NRPB13S 蛋白A/G瓊脂糖凝膠FF預裝柱

相關介紹： 

蛋白A蛋白G瓊脂糖凝膠FF是將重組蛋白A蛋白G融合蛋白（r-PAG，NRPA14S）鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的親和分離介質。與單獨的蛋白A或蛋白G分離介質相比，具有更寬廣的結合范圍，可以與人的所有IgG亞型、IgA、IgE、IgM結合，但不能與小鼠的IgA、IgM和血清白蛋白結合，適合用于鼠IgG單抗的提取和檢測。同時融合后的r-PAG降低對pH的依賴，允許在pH5 ~ 8進行結合。

技術指標：

應用舉例：

結合緩沖液：20 mM磷酸緩沖液，150 mM NaCl，pH 7.4

洗脫緩沖液：0.1 M Glycine-HCl緩沖液，pH 2.5

中和緩沖液：1 M Tris-HCl，pH 9.0

1)1 ml蛋白A蛋白G瓊脂糖凝膠FF預填柱用5 ~ 10個柱床體積的蒸餾水洗去保存液；

2)用結合緩沖液結合緩沖液平衡 5 ~ 10個柱床體積；

3)將3 ml兔多抗血清用結合緩沖液稀釋到15 ml，0.45 μm濾膜過濾上樣；

4)用結合緩沖液再洗 5 ~ 10個柱床體積；

5)用洗脫緩沖液洗脫抗體，收集洗脫峰，并用中和緩沖液調節其pH至中性；

6)目的抗體洗脫后用結合緩沖液清洗5 ~ 10個柱體積平衡柱子；

7)分析洗脫下來的兔多抗。

注：-表示不結合；+表示微弱結合；++表示中等結合；+++表示很強結合。

注意事項：

1)預填柱使用簡易方便，在沒有儀器設備的條件下也可以完成純化任務；

2)樣品洗脫后一般pH很低，應立刻用堿性中和緩沖液（如1 M Tris-HCl，pH 9.0）將收集到的抗體溶液中和到中性，或在收集容器中事先裝5% ~ 10%、pH 7.5的緩沖液（如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸緩沖液），以利于維持抗體的生物活性，避免抗體失活；

3)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內產生氣泡，如果已經產生氣泡，可以自行重裝柱子；

4)多次使用后會有沉淀蛋白，強疏水性蛋白，脂蛋白，脂質體等非特異吸附凝膠上，可以用0.1 %去垢劑短時間清洗，如0.1% Triton X-100清洗2個柱體積，立即用結合緩沖液洗5 ~ 10個柱體積。也可以用70%乙醇清洗作同樣清洗。

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