品 名:重組牛腸激酶(Recombinant Bovine Enterokinase, rb-EK)
目 錄 號:NRPA13S/L
規 格:200 U(液體),1000 U(液體),100 μg,1 mg,特殊訂制
產品形式:液體為1 U/μl rb-EK, 50 mM Tris-HCl, 50%甘油, pH 8.0;凍干粉凍干前為50 mM Tris-HCl(pH 8.0)酶溶液
分 子 量:26.2 kDa(SDS-PAGE檢測約為30 kDa)
等 電 點:5.20
比 活 性:≥40000 U/mg,即1 mg rb-EK至少切割2000 mg融合蛋白。
純 度:≥95%(SDS-PAGE檢測)
A280nm(1 mg/mL):2.06
內 毒 素:≤5 EU/mg
來 源:大腸桿菌
保存條件:-20℃保存
有 效 期:3年
活性定義:25℃,反應緩沖液為50 mM Tris-HCl (pH 8.0),底物為50 μg 1 mg/ml含酶切位點的融合蛋白,16 h內切割95%的融合蛋白所需的酶量為1個酶活力單位(1 U)。
相關介紹:
腸激酶(EC 3.4.21.9)是一種絲氨酸蛋白水解酶,能高效專一地識別蛋白質中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在賴氨酸(Lys,K)的C端水解肽鍵,產生切割,在生物體內水解胰蛋白酶原轉變為胰蛋白酶,由于腸激酶具有高度專一性和高效酶切特性,廣泛應用于基因工程產品的開發。
天然腸激酶由1條115 kDa的重鏈和1 條35 kDa的輕鏈組成,重鏈起錨定細胞膜的作用,輕鏈具有全酶完整的催化活性。本產品采用大腸桿菌分泌表達牛腸激酶的輕鏈活性核心區域(235A.A., 26.2 kDa),比活性更高,特別適用于基因工程融合蛋白的酶切。
注意事項:
1)一些試劑會影響酶的活性,如 >2 M Urea,>250 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1% SDS,>50 mM Imidazole。樣品中如果含有這些成分,需要透析至50 mM Tris-HCl (pH 8.0)。
2)磷酸鹽會抑制腸激酶的活性,應避免使用磷酸鹽緩沖液作為酶切體系。
3)本產品僅限于科研使用。
M:蛋白質分子量標準
Lane 1:rb-EK